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離子交換色譜的保存方法

更新時間:2017-09-06瀏覽:5215次
離子交換色譜是蛋白純化技術(shù)中常用的一種純化方法,其原理是指被分離物質(zhì)所帶的電荷可與離子交換劑所帶的相反電荷結(jié)合,這種帶電分子與固定相之間的結(jié)合作用是可逆的,在改變pH或者用逐漸增加離子強度的緩沖液洗脫時,離子交換劑上結(jié)合的物質(zhì)可與洗脫液中的離子發(fā)生交換而被洗脫到溶液中。由于不同物質(zhì)的電荷不同,其與離子交換劑的結(jié)合能力也不同,所以被洗脫到溶液中的順序也不同,從而被分離出來。

陰離子交換色譜柱的保存色譜柱填充料的不同,其保存方法也各異。一般而言,大多數(shù)陰離子分離柱在堿性條件下保存,陽離子分離柱在酸性條件下保存。需長時間保存時(30天以上),先按要求向柱內(nèi)泵入保存液,然后將柱子從儀器上取下,用無孔接頭將柱子兩端堵死后放在低溫處保存。短時間不用,每周應至少開機一次,讓儀器運行1—2h。
 
陰離子交換色譜柱的清洗清洗色譜柱注意事項:清洗前,應將分離柱與系統(tǒng)分離,讓廢液直接排出。另外,每次清洗后應用去離子水沖洗10min以上,再用淋洗液平衡系統(tǒng)。清洗時的流速不宜過快,在1ml/min以下。
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