糖是自然界分布zui廣泛的有機(jī)化合物群之一,是生物的能源,具有非常重要的作用。糖主要分布在植物、食品中,是決定食品風(fēng)味的zui主要的成分之一,因此,糖類的分析具有非常重要的意義。目前,糖類分離的手段主要是采用液相色譜,檢測(cè)手段主要為示差折光檢測(cè)器。
糖的種類非常的龐大,從分子量來看,有從分子量?jī)H為180的單糖到分子量為幾百萬的多糖,即使同樣的單糖,還包含各種各樣的不同糖類,如葡萄糖,氨基糖,山梨糖醇,糖醛酸等,而且它們還有多種異構(gòu)體。因此,分析糖類有不同的分離方法和檢測(cè)方法。多糖主要采用凝膠色譜法;分離單糖和低聚糖主要采用分配色譜法和配位體交換色譜法。檢測(cè)手段絕大部分為示差折光檢測(cè)器。本實(shí)驗(yàn)采用了比較便宜的分離柱
氨基柱為分離手段,并研究了該方法的穩(wěn)定性。
分析條件
分析柱:氨基柱Asahipak NH2-50 4E (內(nèi)徑4.6mm ×長(zhǎng)250mm)
保護(hù)柱:氨基柱Asahipak NH2-50G 4A (內(nèi)徑4.6mm ×長(zhǎng)10mm)
流動(dòng)相:乙睛:水 (7:3)
流量:0.8mL/min
柱溫:40℃
RID 池溫:40℃
檢測(cè)時(shí)間:15min
進(jìn)樣體積:10μL
標(biāo)樣 葡萄糖,果糖,蔗糖,棉子糖
標(biāo)樣配制
將葡萄糖,果糖,蔗糖,棉子糖標(biāo)樣溶解于水中,配制成25mg/mL、20mg/mL、 15mg/mL、10mg/mL和5mg/mL的混標(biāo)液。各進(jìn)樣10μL ,各重復(fù)2次。分別制作各組分的標(biāo)準(zhǔn)曲線。并計(jì)算各組分的相關(guān)系數(shù)和zui低檢出限。
精密度試驗(yàn)
取15mg/mL的混標(biāo)樣,進(jìn)樣10μL ,連續(xù)測(cè)定6次。
實(shí)際樣品分析
稱取樣品大棗提取液50mg ,溶解于1mL 水中,0.45um 膜過濾后,進(jìn)樣10μL ,重復(fù)3次。
結(jié)果討論
回歸方程 相關(guān)系數(shù) zui低檢測(cè)限LOD(mg/ml)
果糖 Y=1.46×10-40.18
葡萄糖 Y=1.89×10-4X-0.14 蔗糖 Y=1.946×10-4X-0.26 棉子糖
Y=0.31×10-4X+0.12
實(shí)驗(yàn)可以看出,該方法的穩(wěn)定性良好,對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行檢測(cè)也得到了很好的結(jié)果。