丁基疏水色譜柱是一款以粒徑為2.5 um的,丁基鍵合無孔型親水性聚合物基質(zhì)為填充劑的疏水作用色譜柱。適用于蛋白質(zhì)、單抗、酶等生物大分子的分離分析。
采用具有適度疏水性的填料,以含鹽水溶液作流動(dòng)相,借助于溶質(zhì)與固定相間的 疏水相互作用實(shí)現(xiàn)分離的色譜方法。其保留機(jī)理與反相色譜基本相同,所不同的是其固定相的疏水性不如反相固定相強(qiáng),多為低密度分布的甲基、乙基、丙基、丁基和苯基等。疏水作用色譜主要用于蛋白質(zhì)的分離與純化。
1、當(dāng)使用2.1mm內(nèi)徑色譜柱時(shí),建議優(yōu)化系統(tǒng)以減少譜帶展寬。
2、在0.1mL/min流速條件下用純乙腈潤洗色譜柱,然后在2分鐘內(nèi)將流速升至0.5mL/min。
3、使用新鮮潔凈的水與乙腈,沖洗系統(tǒng),確保系統(tǒng)干凈,不含任何緩沖鹽和污染物。
4、將入口端連接到系統(tǒng)上,柱出口端先不要連接,色譜柱身上有箭頭標(biāo)明正確流向。
5、重啟流速,按照步驟4的方法逐漸提高流速,至常規(guī)分析時(shí)所使用的流速。
6、參考柱效測(cè)試報(bào)告中的方法,使用該流動(dòng)相條件平衡色譜柱,通常需要使用5-10倍柱體積的流動(dòng)相,直至壓力與基線穩(wěn)定。
由于和藥物安全以及生產(chǎn)成本息息相關(guān),對(duì)于重組蛋白藥物(包括單抗)的非均一性分析變得越來越被重視。TSKgel Butyl-NPR(4.6 mm ID X 3.5 cm)已經(jīng)上市超過20年了,它以對(duì)蛋白的高速、高分辨率的分離性能為廣大客戶提供了幫助。新上市的Butyl-NPR(4.6 mm ID X 10 cm)色譜柱具有更高的分辨率,可以滿足生物制藥的研究人員對(duì)于HPLC色譜柱的分辨率和分離選擇性的更高要求。