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更新時(shí)間:2022-03-28瀏覽:3964次
 
  氨基柱是同時(shí)可以用于正相和反相條件的一種色譜柱。但正相溶劑和反相溶劑是不互溶的,這一點(diǎn)不能忽略。對(duì)于新購柱子,首先請(qǐng)注意打開分析測試說明書,了解柱子的保存溶劑。如果保存溶劑與你將要使用的流動(dòng)相極性不同不會(huì)互溶,請(qǐng)先用異丙醇過渡。過渡過程中注意因異丙醇粘度較大,會(huì)導(dǎo)致柱壓很高,適當(dāng)調(diào)低流速。如果流動(dòng)相中還有緩沖鹽類,先用不含緩沖鹽的同比例流動(dòng)相過渡,避免緩沖鹽的析出。
  氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的,正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中,例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。
  1、正相使用
  新柱子可直接用流動(dòng)相。推薦先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積,再根據(jù)流動(dòng)相選用極性相近的仿或二氯甲烷以相同的流速?zèng)_10倍柱體積,后換成流動(dòng)相。
 ?、僬嗍褂脮r(shí),不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于還原糖的分析;流動(dòng)相要*脫氣,并不得含有羰基化合物和過氧化物(質(zhì)量不好的yi醚、四呋喃含有少量)。
 ?、谌魏螘r(shí)候更換流動(dòng)相時(shí)都要確保新流動(dòng)相與柱子原保存液可互溶。
  2、反相使用
 ?、佟⑾扔谜和?乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積,再依次以相同的流速相同的用量用仿、異丙醇、甲醇、甲醇-水(50:50)沖柱子。
 ?、?、以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的氧化鈉(LUNA)水溶液沖柱子(注意pH值切不可超過11.0),立即用水(0.5ml/min的流速,30倍柱體積)沖洗,再換成流動(dòng)相。
 ?、?、配制流動(dòng)相時(shí),應(yīng)各組分分別量取,比例較小的組分要精密量取,需調(diào)pH值時(shí)要精密到0.1。
  ④、反相條件下使用時(shí),要特別注意控制pH值范圍,pH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn),流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)。的pH范圍在
 ?、?、如果要使用的流動(dòng)相中還含有緩沖鹽類,建議在用分析流動(dòng)相之前,先用不含緩沖鹽的同比例流動(dòng)相過渡,這樣可避免緩沖鹽在分析柱內(nèi)的析出。
 ?、?、有一種情況是,當(dāng)使用氨基柱進(jìn)行酸性物質(zhì)的分析時(shí),酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在,可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化,導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。建議:用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱(沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨),之后再進(jìn)行分析這類酸性分析物時(shí)建議在流動(dòng)相中略微添加少許氨如0.1%。

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