丁基疏水色譜柱是一款以粒徑為2.5um的，丁基鍵合無(wú)孔型親水性聚合物基質(zhì)為填充劑的疏水作用色譜柱。適用于蛋白質(zhì)、單抗、酶等生物大分子的分離分析。由于和藥物安全以及生產(chǎn)成本息息相關(guān)，對(duì)于重組蛋白藥物（包括單抗）的非均一性分析變得越來(lái)越被重視。TSKgelButyl-NPR（4.6mmIDX3.5cm）已經(jīng)上市超過(guò)20年了，它以對(duì)蛋白的高速、高分辨率的分離性能為廣大客戶(hù)提供了幫助。新上市的Butyl-NPR（4.6mmIDX10cm）色譜柱具有更高的分辨率，可以滿(mǎn)足生物制藥的研究人員對(duì)于HPLC色譜柱的分辨率和分離選擇性的更高要求。
采用具有適度疏水性的填料，以含鹽水溶液作流動(dòng)相，借助于溶質(zhì)與固定相間的疏水相互作用實(shí)現(xiàn)分離的色譜方法。其保留機(jī)理與反相色譜基本相同，所不同的是其固定相的疏水性不如反相固定相強(qiáng)，多為低密度分布的甲基、乙基、丙基、丁基和苯基等。疏水作用色譜主要用于蛋白質(zhì)的分離與純化。
丁基疏水色譜柱的使用注意事項(xiàng)：
1、使用新鮮潔凈的水與乙腈。沖洗系統(tǒng)，確保系統(tǒng)干凈，不含任何緩沖鹽和污染物。
2、取用色譜柱時(shí)避免磕碰掉落。
3、將丁基疏水色譜柱入口端連接到系統(tǒng)上，柱出口端先不要連接，色譜柱身上有箭頭標(biāo)明正確流向。
4、在0.1mL/min流速條件下用純乙腈潤(rùn)洗色譜柱，然后在2分鐘內(nèi)將流速升至0.5mL/min。
5、當(dāng)溶劑均勻的從柱出口端流出，停流速，將色譜柱出口端接到系統(tǒng)檢測(cè)器上（這樣可以避免氣泡進(jìn)入檢測(cè)系統(tǒng)，并且可快速達(dá)到基線平衡）。
6、重啟流速，按照步驟4的方法逐漸提高流速，至常規(guī)分析時(shí)所使用的流速。
7、參考柱效測(cè)試報(bào)告中的方法，使用該流動(dòng)相條件平衡色譜柱，通常需要使用5-10倍柱體積的流動(dòng)相，直至壓力與基線穩(wěn)定。
8、測(cè)試丁基疏水色譜柱柱效。如果沒(méi)有柱效測(cè)試報(bào)告中的分析物，請(qǐng)廠家部門(mén)尋求支持，使用合適的濃度與進(jìn)樣量。柱效結(jié)果略低于柱效測(cè)試報(bào)告屬正常情況。如結(jié)果明顯偏低、峰形拖尾，提示色譜柱和/或所使用的液相系統(tǒng)處于非理想狀態(tài)，需要進(jìn)行故障排查。當(dāng)使用2.1mm內(nèi)徑色譜柱時(shí)，建議優(yōu)化系統(tǒng)以減少譜帶展寬，包括：使用檢測(cè)器微量流通池，減少進(jìn)樣器loop環(huán)體積，使用較小內(nèi)徑（如0.005''或0.12mm）的系統(tǒng)管路。并確保管路與丁基疏水色譜柱連接恰當(dāng)、無(wú)死體積。當(dāng)使用小顆粒填料（如2.5μm）短柱進(jìn)行快速分離時(shí)，需要考慮以下因素：
1、確保管路丁基疏水色譜柱連接恰當(dāng)、無(wú)死體積，盡量?jī)?yōu)化系統(tǒng)減少譜帶展寬；
2、提高采樣頻率至10點(diǎn)/秒以上；
3、較小粒徑的色譜柱產(chǎn)生的柱壓較高，而較小粒徑要達(dá)到*色譜效率所需的線速度較高，請(qǐng)根據(jù)所用LC系統(tǒng)的實(shí)際情況調(diào)節(jié)流速；
4、可使用較高的柱溫來(lái)補(bǔ)償小顆粒造成的壓力升高，例如40?C。使用雜化顆粒反相色譜柱時(shí)，可使用45?C或更高。
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