層析柱的應(yīng)用領(lǐng)域介紹

層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體，一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。根據(jù)樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數(shù)不同，從而分離的一種層析法。層析柱是層析實(shí)驗(yàn)的主體，可根據(jù)所要分離的樣品的大小、性質(zhì)決定層析柱的直徑尺寸和填充物。

 

應(yīng)用領(lǐng)域：

1、植物、中藥有效成分地分離。

2、中藥有效成分地精制。

3、中藥中雜質(zhì)的清除。

4、化工中間體、合成產(chǎn)品的純化。

5、蛋白純化、可以適配AKTA等蛋白純化儀。

 

層析柱的裝柱非常重要，裝柱的效果會直接影響層析分離效果。有濕法裝柱和干法裝柱等兩種方法。

濕法裝柱很簡單，使用也更普遍，就是先用比固定相多一倍的洗脫劑將固定相活成勻漿，柱子底部先用脫脂棉塞緊，然后倒入洗脫劑將脫脂棉中氣泡趕出。用漏斗將活好的固定相倒入柱子中，打開底部活塞，將柱子中高出固定相的溶劑放出。期間不斷用橡皮棒敲打，將固定相敲實(shí)， 做到密實(shí)均勻無氣泡即可。很多時(shí)候用加壓的方法可以很高效地裝好柱子，而且在柱子中沒有氣泡產(chǎn)生。

 

干法裝柱與濕法裝柱剛好相反的是，它是將干燥的吸附劑從柱子上端直接加入到一個(gè)空的柱子中，然后用油泵抽柱子底部，相當(dāng)于減壓過柱，直到柱子變得很結(jié)實(shí)， 再用淋洗劑“走柱子” 。

 

干法裝柱的一個(gè)缺點(diǎn)就是在裝入洗脫劑后，由于溶劑和固定相之間的吸附放熱，所以柱子容易變花，影響分離效果。解決的方法是：

（1）固定相一定要添加結(jié)實(shí)；

（2）一定要用較多的溶劑“走柱子”，直到柱子的下端不再發(fā)燙，恢復(fù)到室溫后再撤去壓力。無論使用哪種方法裝柱，后都要求所裝的柱子結(jié)實(shí)、勻稱、無氣泡。