凝膠滲透色譜儀是一種常用的分離和純化生物大分子的工具。它基于凝膠過濾原理,通過不同孔徑大小的凝膠粒子,將待分離混合物中的分子按照其分子量大小分離開來。
凝膠滲透色譜儀由樣品進樣系統(tǒng)、流動相系統(tǒng)、柱體和檢測器組成。首先,待測樣品被注射到樣品進樣系統(tǒng)中,然后被輸送到柱體中。柱體內填充有大小不同的凝膠顆粒,這些凝膠顆粒構成了一個分子篩。樣品分子在流動相的推動下進入凝膠顆粒內部,越小的分子會更容易穿過凝膠顆??紫?,而較大的分子則會受限于凝膠顆粒的孔隙,因此會留在凝膠顆粒外面形成一個分子堆積層。這樣,在柱體里就可以將不同分子大小的物質進行有效地分離。
檢測器通常采用紫外吸收檢測器,可以根據樣品分子的不同特性來選擇適當的波長進行檢測。通過分析檢測器輸出的信號,我們可以確定分子的分子量大小以及其在樣品中的相對含量。
凝膠滲透色譜儀廣泛應用于多種生物大分子的分離和純化,如蛋白質、DNA、RNA等。它具有操作簡便、分離精度高、分離速度快等優(yōu)點,是生物學和生物化學領域重要的工具之一。