親水色譜柱是一種專門設計用于分離親水性和極性化合物的色譜柱。利用固定相上的親水性基團與樣品中的極性基團之間的相互作用，實現(xiàn)對極性化合物的有效分離。其工作原理基于親水作用和可能的離子交換作用。在分離過程中，水相固定相上的親水性基團與待分離物質(zhì)中的極性基團發(fā)生相互作用，從而實現(xiàn)物質(zhì)的分離和純化。
親水色譜柱的特點主要體現(xiàn)在以下幾個方面：
1、分離原理d特：
分配平衡與親水相互作用：利用樣品在流動相和固定相中的分配平衡，樣品中的極性官能團與固定相表面進行親水相互作用。其核心思想在于利用高乙腈低水含量的流動相與極性固定相的組合，通過按照親水性由小到大的順序梯度洗脫分析物。
2、固定相特性：
極性強：親水作用色譜柱的固定相是親水的，并且通常在一定pH范圍內(nèi)是帶電荷的。親水性越強的化合物，被保留的時間越長。常見的固定相類型有純硅膠柱、氨基柱、二醇基柱、酰胺基柱等。
耐水性要求高：專為親水作用色譜設計的色譜柱，對固定相的耐水性要求更高，否則會因固定相的水解出現(xiàn)基線噪音大、色譜柱壽命短等問題。例如，純硅膠柱有固定相不易流失的優(yōu)點，在使用CAD、ELSD和LC-MS檢測器時，受歡迎；氨基柱特別適合碳水化合物（糖類）分離。
3、流動相特點：
有機相比例高：流動相中有機相的比例較高，而水的比例相對較低。典型的HILIC分離條件中，流動相中水的含量通常在3%至40%之間波動。當水的含量超過40%時，保留效果往往會減弱。
水膜形成：普遍認為HILIC流動相中的水會被吸附到極性固定相的表面形成水膜，然后分析物在水膜和流動相之間進行液液分配作用，加上極性官能團和固定相之間的氫鍵作用力、離子官能團之間的靜電作用力等，實現(xiàn)被分析物的保留。水膜的作用非常重要，所以HILIC流動相中至少含有3%的水。
4、分離優(yōu)勢：
改善強極性物質(zhì)保留行為：親水作用色譜是一種用來改善在反相色譜中保留較差的強極性物質(zhì)保留行為的色譜技術(shù)。它能夠成功提高對極性非常強的物質(zhì)的保留，為包含極性物質(zhì)和可離子化合物的混合物提供正交于反相色譜的獨立分離模式。
適用于多種化合物：對于強極性和親水性的小分子物質(zhì)、堿性化合物以及一些難以在反相色譜中保留的化合物，親水作用色譜具有較好的分離效果。
5、應用范圍廣：
復雜樣品的分析：親水作用色譜技術(shù)以其d特的分離模式和優(yōu)勢，在復雜樣品的分析中展現(xiàn)出巨大潛力?？捎糜谒幬锓治?、生物化學、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。
與質(zhì)譜聯(lián)用：由于流動相中有機相比例高，這樣的流動相組成尤其有利于提高電噴霧離子化質(zhì)譜（ESI-MS）的靈敏度。
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